¿Qué es el Protocolo de ELISA?

January 12

Un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) es una prueba común que se utiliza en la inmunología para detectar antígenos o anticuerpos. Los antígenos provocan una reacción del sistema inmune - en otras palabras, que causan enfermedades. ELISA se utiliza para detectar muchos antígenos bacterianos y virales, incluyendo el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), malaria, cólera, el sarampión, las paperas y. Un protocolo de ELISA ligeramente diferente puede ser utilizado para detectar anticuerpos frente a estos y muchos otros patógenos. Un protocolo de ELISA es el procedimiento paso a paso para realizar un ELISA específico.

Aunque el protocolo de ELISA varía ligeramente, dependiendo del tipo de ELISA se realiza, el concepto básico es el mismo para todos ellos. ELISA depende de anticuerpos ligados a enzimas, también llamados antiglobulinas. Una molécula de señal conectados a estos antiglobulinas provoca un sustrato añadido durante el ensayo para cambiar el color, si el antígeno o el anticuerpo deseado está presente. La cantidad de antígeno o anticuerpo presente es proporcional a la cantidad de cambio de color, que puede ser medida con un lector de placa electrónica.

Hay tres tipos principales de ELISA. Un ELISA directo se utiliza generalmente para detectar antígenos en lugar de anticuerpos. Este es el protocolo más simple ELISA, como el anticuerpo unido a enzima se une directamente al antígeno deseado. Se añade entonces sustrato para determinar la cantidad de antígeno presente.

Un ELISA indirecto se utiliza para detectar anticuerpos, mientras que otro tipo de ELISA indirecta - llamado un sándwich ELISA - se puede utilizar para detectar antígenos. Un protocolo de ELISA sándwich requiere dos anticuerpos, llamados los anticuerpos de captura y detección, para unirse al antígeno deseado. Se añade una antiglobulina, que se une al anticuerpo de detección, y se añade el sustrato. El ELISA indirecto sigue un protocolo similar, pero utiliza un antígeno de captura en lugar de un anticuerpo de captura con el fin de detectar el anticuerpo deseado.

ELISA de competición se utiliza a menudo para la detección de antígenos que están presentes en bajas concentraciones, ya que es un ensayo muy sensible. En contraste con los otros protocolos de ELISA, ELISA competitivo utiliza un antígeno ligado a enzimas en lugar de un anticuerpo, y un método de cuantificación ligeramente diferente. En ella, la muestra que contiene el antígeno a detectar y el antígeno unido a enzima se añade tanto a un anticuerpo, y los dos antígenos compiten por los sitios de unión a anticuerpo. Cuando se añade el sustrato, el cambio de color es mayor, con una mayor proporción de antígenos ligados a enzimas unidas a los antígenos muestra unida. Esto significa que se detecta mayor cambio de color en concentraciones más bajas del antígeno de la muestra, que es lo que hace este método tan sensible.

  • Un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) es una prueba común que se utiliza en la inmunología para detectar antígenos o anticuerpos.